长链非编码肌动纤维相关蛋白1-反义RNA1影响肺癌A549细胞迁移的机制

目的探讨长链非编码RNA分子肌动纤维相关蛋白1-反义RNA1(AFAP1-AS1)对肺癌细胞迁移能力的影响及其机制,为开发肺腺癌新的治疗方法提供依据。方法体外培养A549细胞,分为无干预组、无关小干扰RNA(siRNA)组、靶向AFAP1-AS1基因的siRNA (si-AA1)处理组和LY294002处理组。无干预组加入Lip2000;无关siRNA组采用Lip2000转染无关siRNA(100 nmol/L);si-AA1处理组采用Lip2000转染si-AA1(100 nmol/L),细胞转染后继续培养24 h;LY294002处理组加入LY294002,培养24 h。用Western blot法检测Akt、pAkt和E-钙粘素(E-cadherin)含量;用qRTPCR法检测mRNA含量;采用划痕实验检测细胞迁移能力。采用SPSS 19.0软件进行单因素方差分析和Dunnett’s T3检验。结果与无干预组和无关siRNA组比较,si-AA1处理组和LY294002处理组的E-cadherin蛋白相对水平(0.68±0.11、0.86±0.10)显著增多,差异均有统计学意义(P<0.01);si-AA1组的Akt蛋白和pAkt蛋白水平未见改变,差异无统计学意义(P>0.05)。si-AA1处理组、LY294002处理组的E-cadherin基因转录条件相对水平分别为1.52±0.10和1.65±0.13,均明显高于无关siRNA组(0.96±0.14)和无干预组(1.00±0.12),差异均有统计学意义(P<0.01)。si-AA1组和LY294002组的细胞迁移率分别为26.2%±8.7%和24.1%±7.5%,低于无关siRNA组(37.5%±10.1%)和无干预组(38.1%±9.2%),差异均有统计学意义(P<0.05)。结论长链非编码RNA分子AFAP1-AS1的表达影响肺癌细胞迁移能力;当其表达受到抑制后,Akt信号通路未发生活化,E-cadherin基因转录和蛋白表达发生上调,造成细胞迁移能力减弱。