基于微滴数字PCR的巨细胞病毒gH分型检测可行性评估及应用

探讨应用微滴数字PCR(ddPCR)进行巨细胞病毒(CMV)包膜糖蛋白H(gH)分型检测的可行性。方法 以标准株AD169和Towne为研究对象,荧光定量PCR (RT-PCR)检测为对照,进行ddPCR的敏感性、特异性、结果一致性和结果变异性检测。收集CMV特异性抗体G(CMV-IgG)阳性,肝功能异常的婴儿尿液样本采用ddPCR进行临床CMV gH分型检测。结果 ddPCR检测的结果一致性、结果变异性和检测特异性与RT-PCR一致,ddPCR敏感性较RT-PCR高。临床样本ddPCR检测结果为:gH1型41例,gH2型23例,gH1/2型11例,与RT-PCR分型结果一致率86.67%(65/75)。对于分型结果一致的65个样本,RT-PCR和ddPCR检测浓度有较好的一致性。依据ddPCR分型结果进行临床指标分析发现,相较于gH2型,gH1型CMV感染更易促进血清丙氨酸氨基转移酶水平升高[(33/41)比(13/23),χ2=4.927,P=0.026]。结论 ddPCR可用于检测尿液中CMV gH分型情况,具有更好的敏感性。