土荆皮乙酸抑制高糖诱导的H9C2心肌细胞损伤和NLRP3炎性小体的激活

目的:探讨二萜类天然化合物土荆皮乙酸对高糖诱导的心肌细胞H9C2损伤和NLRP3炎症小体的抑制作用。方法:采用CCK-8法检测H9C2细胞活力,LDH试剂盒检测H9C2细胞中LDH活性;ELISA试剂盒检测炎性细胞因子TNF-α、IL-1β、IL-18含量;Western Blot检测炎性相关蛋白CD36、COX2、iNOS、p-NF-κB p65表达;TUNEL+DAPI双染法检测心肌细胞H9C2凋亡率;Western Blot检测凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2、NLRP3、ASC、Caspase-1表达。结果:高糖(30 mmol/L)诱导24、48、72 h后,H9C2细胞活力显著降低,LDH活性显著升高(P<0.001),土荆皮乙酸低、中、高浓度(2、4、8μmol/L)处理高糖诱导的细胞24、48、72 h后,H9C2细胞活力显著升高,LDH活性显著降低(P<0.05~P<0.001);与模型组比较,土荆皮乙酸组细胞IL-6、IL-18、TNF-α含量及CD36、COX2、iNOS、p-NF-κB p65蛋白表达显著降低(P<0.001),土荆皮乙酸高浓度效果最佳;TUNEL+DAPI双染结果表明土荆皮乙酸可有效降低高糖诱导的H9C2细胞凋亡(P<0.01或P<0.001);Western Blot结果表明,与模型组比较,随着土荆皮乙酸浓度提高,Bcl-2蛋白表达显著升高,而Bax、NLRP3、ASC、Caspase-1蛋白表达显著降低(P<0.05~P<0.01)。结论:当土荆皮乙酸浓度高于8μmol/L时,对高糖诱导的H9C2心肌细胞损伤、凋亡、炎性因子和NLRP3炎症小体具有抑制作用。