红腺忍冬遗传转化体系的优化

目的:对已建立的红腺忍冬转化体系进行优化。方法:用无菌种子苗作为遗传转化的试验材料,在农杆菌侵染条件下,研究叶片、叶柄、无芽茎段和带芽茎段4个不同部位以及不同头孢霉素浓度下叶片外植体芽诱导的表现;在最佳头孢霉素浓度下对这4种外植体进行遗传转化实验,以估算各自的转化效率,进一步确定最适的转化材料。结果:在这4种外植体中,叶片和带芽茎段的芽诱导率最高,出芽数最多;头孢霉素能够抑制外植体农杆菌LBA4404的生长;当其在芽诱导培养基中的浓度为30 mg/L时,叶片外植体出芽率最高,出芽数最多;PCR阳性株鉴定表明,此体系的叶片、无芽茎段、叶柄和带芽茎段的转化率依次为8.56%、5.97%、4.53%和3.09%。结论:最适宜的抑菌抗生素头孢霉素的浓度是30 mg/L,叶片是红腺忍冬遗传转化的最适宜外植体。