虎尾轮根黄酮类提取物影响结直肠癌细胞SW620增殖、克隆形成、凋亡及PI3K/AKT通路的研究

目的:探讨虎尾轮根黄酮类提取物对体外培养的人结直肠癌细胞SW620增殖、克隆形成、凋亡及PI3K/AKT信号通路的影响。方法:用不同质量浓度(0、10、25、50、100、250、500μg/mL)的虎尾轮根黄酮类提取物处理结直肠癌SW620细胞24 h,采用细胞计数(CCK-8)法检测虎尾轮根黄酮类提取物对SW620细胞增殖抑制的影响,筛选半数抑制浓度(IC_(50))作为后续实验干预浓度;实验分为4组,空白对照组、虎尾轮根黄酮类提取物(100μg/mL)组、通路特异性抑制剂LY294002(25μmol/L)组和虎尾轮根黄酮类提取物(100μg/mL)+LY294002(25μmol/L)组。克隆形成实验、流式细胞术和AnnexinⅤ-FITC/PI双染色法检测细胞克隆形成、周期进程和凋亡情况,实时荧光定量聚合酶链式反应(qPCR)检测增殖细胞核抗原(PCNA)及凋亡相关基因B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bax)的表达量,蛋白免疫印迹法(Western blot)分析PI3K/AKT信号通路蛋白激酶B(AKT)磷酸化水平。结果:虎尾轮根黄酮类提取物可呈浓度依赖性抑制结直肠癌SW620细胞增殖,其干预SW620细胞24 h的IC_(50)为104.5μmol/L。与空白对照组比较,虎尾轮根黄酮类提取物组、LY294002组和虎尾轮根黄酮类提取物+LY294002组细胞克隆形成率显著降低、凋亡率及G_(0)/G_(1)期细胞比例显著升高,PCNA、Bcl-2 mRNA表达显著降低,Bax mRNA表达显著升高,AKT磷酸化水平显著降低(P<0.05);与虎尾轮根黄酮类提取物组及LY294002组比较,虎尾轮根黄酮类提取物+LY294002组上述各指标均显著改善(P<0.05)。结论:虎尾轮根黄酮类提取物可抑制结直肠癌SW620细胞增殖和克隆形成,并诱导细胞凋亡,其机制可能与抑制PI3K/AKT信号通路有关。