樟芝多糖通过调控炎性小体活化抑制LPS诱导的肝巨噬细胞炎症因子释放

目的:研究樟芝多糖通过降低NLRP3小体活化抑制LPS诱导的肝巨噬细胞炎症因子释放的作用。方法:体外培养肝巨噬细胞,将肝巨噬细胞分为对照组、模型组、樟芝多糖组,其中樟芝多糖组细胞分别采用终浓度为5、10、20 mg/L的樟芝多糖预处理,LPS的终浓度为20μg/L,进行肝巨噬细胞炎性损伤的诱导。MTT法检测细胞活力的改变,Annexin-FITC/PI染色后流式细胞仪检测细胞凋亡,TUNEL染色观察肝巨噬细胞的凋亡,收集细胞后Western blot法检测细胞中NLRP3、ASC、Caspase-1、Pro-Caspase-1蛋白表达,收集培养基上清液检测LDH、IL-1β、IL-18、IL-6水平。结果:樟芝多糖预处理后可以显著降低LPS诱导的肝巨噬细胞炎症性损伤,CCK-8结果显示,樟芝多糖组细胞活力显著高于模型组(P<0.05)。流式细胞术检测结果显示,樟芝多糖组细胞凋亡率显著低于模型组(P<0.05)。TUNEL染色结果也显示樟芝多糖预处理可显著降低LPS诱导的肝巨噬细胞凋亡。Western blot结果显示樟芝多糖可降低肝巨噬细胞中NLRP3、ASC、Caspase-1蛋白表达,同时抑制Pro-Caspase-1的剪切。樟芝多糖组培养基上清液中LDH、IL-1β、IL-18、IL-6的水平显著低于模型组。结论:樟芝多糖可通过降低NLRP3小体的活化,抑制LPS诱导的肝巨噬细胞炎症因子释放。