蒙药塔布森-2对于绝经后骨质疏松大鼠软骨细胞自噬的影响

目的:采取手术切除大鼠卵巢的方法制造骨质疏松模型,采用复方蒙药塔布森-2干预骨质疏松大鼠,验证蒙医学传统理论骨枯症“治以补暖补精,抑制赫依过剩”,蒙药塔布森-2抗骨质疏松“补暖、补精-抑制赫依-固骨质、壮骨”的生物学效应。方法:选择6月龄SD系SPF级健康雌性大鼠70只,随机分为7组,每组10只,分别为空白对照组,去卵巢骨质疏松模型组,蒙药塔布森-2高、中、低剂量组,中药对照组骨疏康组、阳性对照组己烯雌酚组。实验大鼠以浓度为7%的水合氯醛溶液(3 mL/kg)腹腔注射麻醉,由背部进入,完整摘除双侧卵巢,止血缝合。空白对照组仅将卵巢从腹腔提出而不切除(仅切除卵巢周围少量脂肪组织)。术后10周分别随机选出10只大鼠采用双能X线骨密度仪检测骨密度,以验证造模是否成功。术后正常饲喂12周,从第13周开始,各组给药体积均为1 mL(100 g体质量·d)。连续给药12周。灌胃直至第24周期满,末次给药后活体测量全身骨密度。麻醉致死大鼠,打开大鼠右侧膝关节,用刀片小心刮下附着在膝关节骨表面的关节软骨,取材后-80℃冻存,用于Western Blot免疫印迹分析。数据使用SPSS19.0统计学软件处理,每组数据用均数±标准差的形式统计,P<0.05为差异有统计学意义。结果:SD雌性大鼠对比空白对照组,中药对照组骨疏康组,阳性对照组己烯雌酚组,蒙药塔布森-2高、中剂量治疗组,模型组,蒙药塔布森-2低剂量治疗组骨密度降低,Western Blot免疫印迹分析软骨组织内LC3、TOM20蛋白表达降低,差异有统计学意义(P<0.05)。空白对照组,中药对照组骨疏康组、阳性对照组己烯雌酚组,蒙药塔布森-2高、中剂量治疗组比较,骨密度,Western Blot免疫印迹分析软骨组织内LC3、TOM20蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05)。模型组、蒙药塔布森-2低剂量治疗组比较,骨密度,Western Blot免疫印迹分析软骨组织内LC3、TOM20蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论:复方蒙药塔布森-2可以增强去卵巢绝经后骨质疏松大鼠的骨密度,抑制其骨丢失,复方蒙药塔布森-2具有明确的抗绝经后骨质疏松作用。探讨蒙药塔布森-2“补肾气、补暖、补精—抑制赫依—固骨质、壮骨”治疗骨质疏松症疗效机制,可为蒙医药防治骨质疏松症研究提供新思路。