靶向uPAR的CAR-NK细胞通过清除衰老细胞减轻老年小鼠衰老相关表型

目的探索靶向尿激酶型纤溶酶原激活物受体(uPAR)的嵌合抗原受体修饰的自然杀伤(NK)细胞(CAR-NK细胞)是否可以特异性清除老年小鼠体内的衰老细胞。方法辐照法诱导脂肪前体细胞衰老;流式细胞术检测uPAR表达、NK细胞纯度及uPAR-CAR-NK细胞阳性率;衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色法检测衰老细胞的数目;乳酸脱氢酶(LDH)法检测uPAR-CAR-NK细胞对衰老细胞的细胞毒性;活体成像检测uPAR-CAR-NK细胞对衰老细胞的体内清除能力;Western印迹法检测衰老标志物P16表达。结果辐照可诱导脂肪前体细胞产生显著的细胞衰老,且衰老细胞显著上调uPAR的表达;利用慢病毒感染法成功获得uPAR-CAR-NK细胞;uPAR-CAR-NK细胞可以在体外及体内显著杀伤衰老的脂肪前体细胞(P<0.05);uPAR-CAR-NK细胞显著清除老年小鼠体内的衰老细胞,显著降低组织中衰老标志物P16的表达水平(P<0.05)。结论uPAR-CAR-NK细胞可以在体内外有效清除衰老细胞,是一种潜在的抗衰老策略。