膜联蛋白A1对冠心病模型大鼠心肌损伤及中性粒细胞胞外诱捕网形成的影响

目的探究膜联蛋白(ANX)A1对冠心病(CHD)模型大鼠心肌损伤及中性粒细胞胞外诱捕网(NET)形成的影响及机制。方法将60只SD大鼠按照随机数字表法分为对照组、模型组、Ac2-26组、hrANXA1组,每组15只,除对照组外,其余3组均采用高脂饮食饲养联合腹腔注射垂体后叶素构建CHD模型,造模后,Ac2-26组和hrANXA1组分别腹腔注射Ac2-26(1 mg/kg)、hrANXA1(10μg/ml),每日1次,连续14 d。给药结束后,小动物超声成像系统测定各组大鼠左心室射血分数(LVEF)、左心室短轴缩短率(LVFS)、左心室舒张末期内径(LVEDD)及左心室收缩末期内径(LVESD),酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组血清中白细胞介素(IL)-1β、IL-6和肿瘤坏死因子(TNF)-α含量,各试剂盒检测各组心肌组织超氧化物歧化酶(SOD)活性与丙二醛(MDA)含量,苏木素-伊红(HE)染色观察各组心肌组织病理学变化,TUNEL染色测定各组心肌细胞凋亡情况,免疫荧光染色检测各组心肌组织内组件蛋白瓜氨酸化组蛋白(Cit)H3与髓过氧化物(MPO)的表达强度,Western印迹法测定各组心肌组织内CitH3、MPO及肽酰基精氨酸脱亚氨酶(PAD)4的蛋白表达量。结果与对照组比较,模型组LVEF和LVFS降低,LVEDD和LVESD增加,血清IL-1β、IL-6、TNF-α含量均升高,心肌组织SOD活性下降、MDA含量增高,心肌组织明显损伤并伴有大量炎性细胞浸润,TUNEL阳性率增加,心肌组织中绿色荧光标记MPO与红色荧光标记CitH3的荧光强度均增加,MPO、CitH3、PAD4蛋白相对表达量均上调,差异均具有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,Ac2-26组和hrANXA1组LVEF和LVFS升高,LVEDD和LVESD降低,血清IL-1β、IL-6、TNF-α含量均下降,心肌组织SOD活性升高而MDA含量减少,心肌组织损伤现象得到明显改善,炎性细胞浸润也减轻,TUNEL阳性率降低,同时,心肌组织中绿色荧光标记MPO与红色荧光标记CitH3的荧光强度均减弱,MPO、CitH3、PAD4蛋白相对表达量也均下调,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论ANXA1可减轻CHD模型大鼠心肌组织炎性浸润,抑制炎症反应、氧化应激反应及NET形成,对CHD大鼠发挥保护作用。