当归补血汤联合针灸对肺纤维化大鼠肺上皮细胞的保护作用及PI3K/Akt通路的影响

目的探讨当归补血汤联合针灸对肺纤维化(PF)大鼠肺上皮细胞的保护作用及磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)通路的影响。方法55只大鼠随机分为正常组、PF组、针灸组、当归补血汤组及针灸+当归补血汤组,每组11只。除正常组外均建立肺纤维化大鼠动物模型,建模成功后次日当归补血汤组及针灸+当归补血汤组灌胃当归补血汤,至第15天针灸组及针灸+当归补血汤组进行针灸治疗,其余组别均灌胃等体积的生理盐水。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒检测肺组织Ⅲ型胶原(COL)3、基质金属蛋白酶抑制因子(TIMP)-1浓度,苏木素-伊红(HE)染色及Masson染色观察肺组织病理及纤维化程度,计算病理评分,TUNLE方法检测肺泡上皮细胞凋亡率;免疫组化检测肺组织凋亡相关基因B细胞淋巴瘤(Bcl)-2及Bcl-2相关X蛋白(Bax)及Western印迹检测PI3K、Akt、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)蛋白。结果与正常组相比,PF组、针灸组、当归补血汤组COL3、TIMP-1、Szapiel、Ashcroft评分、肺泡上皮细胞凋亡率、Bax、PI3K、Akt、mTOR均明显升高,Bcl-2明显降低(P<0.05);与PF组相比,针灸组、当归补血汤组、针灸+当归补血汤组COL3、TIMP-1、Szapiel、Ashcroft评分、肺泡上皮细胞凋亡率、Bax、PI3K、Akt、mTOR均明显降低,Bcl-2明显升高(P<0.05);与针灸组、当归补血汤组比较,针灸+当归补血汤组COL3、TIMP-1、Szapiel、Ashcroft评分、肺泡上皮细胞凋亡率、Bax、PI3K、Akt、mTOR均明显降低,Bcl-2明显升高(P<0.05)。结论当归补血汤联合针灸可显著改善PF大鼠炎症浸润及PF程度,可通过抑制Bax上调Bcl-2表达而抑制肺泡上皮细胞凋亡,可能与抑制PI3K、Akt、mTOR蛋白表达相关。