基于PEPK/CHOP途径探讨补中益气汤联合针刺夹脊穴治疗脊髓损伤尿潴留的分子机制

目的基于蛋白激酶样内质网激酶(PERK)/CCAAT-增强子同源性蛋白(CHOP)通路探究补中益气汤联合针刺夹脊穴治疗脊髓损伤性尿潴留(UR)的分子机制。方法建立脊髓损伤性UR大鼠模型,并随机分为模型组、补中益气汤组、针刺夹脊穴组、针药联合组、PERK激活剂组、针药联合+PERK激活剂组各15只,另取15只大鼠为对照组。检测大鼠尿动力学指标(膀胱最大容量、膀胱顺应性等);电镜观察逼尿肌细胞内质网结构;TUNEL染色观察逼尿肌细胞凋亡;天狼猩红染色观察膀胱纤维化变化;Western印迹检测PERK、CHOP、真核细胞起始因子(elF)2α、转录活化因子(ATF)4、抗凋亡蛋白B细胞淋巴瘤(Bcl)-2、促凋亡蛋白Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白表达。结果与对照组相比,模型组膀胱最大容量、最大收缩压、膀胱顺应性均明显降低,逼尿肌组织细胞内质网结构损伤、细胞凋亡、纤维化严重,内质网应激通路PERK-elF2α-ATF4-CHOP处于活化状态,逼尿肌组织抗凋亡蛋白明显降低,而促凋亡蛋白升高,逼尿肌细胞凋亡率明显升高(P<0.05)。与模型组相比,针药联合组、补中益气汤组、针刺夹脊穴组逼尿肌细胞凋亡、内质网损伤、纤维化均明显降低,PERK-elF2α-ATF4-CHOP通路蛋白表达明显降低(P<0.05),且针药联合组的改善作用明显优于补中益气汤组和针刺夹脊穴组(P<0.05);PERK激活剂组PERK-elF2α-Atf4-CHOP通路进一步活化,逼尿肌组织细胞凋亡最严重(P<0.05)。PERK激活剂可明显削弱针药联合发挥的抗逼尿肌胞凋亡及抑制PERK-elF2α-ATF4-CHOP通路活化作用(P<0.05)。结论补中益气汤联合针刺夹脊穴可通过抑制内质网应激PERK-elF2α-ATF4-CHOP通路活化,来降低逼尿肌细胞凋亡,改善UR症状。