芪术颗粒对大鼠肝缺血/再灌注损伤中SHH信号的影响机制

目的探讨芪术颗粒(QZG)对肝组织缺血再灌注损伤(I/R)中胚胎发育相关音速波状蛋白(SHH)信号的影响机制。方法动物实验:构建大鼠肝脏I/R模型,分为假手术(Sham)组、I/R组、I/R+QZG处理(I/R+QZG)组、I/R+QZG+SHH信号抑制剂环巴胺(CPA,I/R+QZG+CPA)组、I/R+CPA(I/R+CPA)组;检测各组血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天冬氨酸氨基转移酶(AST)、超氧化物歧化酶(SOD)的活性和脂质过氧化产物丙二醛(MDA)含量。TUNEL染色检测肝组织细胞凋亡;细胞实验:构建大鼠正常肝细胞BRL-3A氧葡萄糖剥夺/再灌注(OGD/R)损伤模型分为正常细胞(Control)组、模型(OGD/R)组、OGD/R+CPA组、OGD/R+QZG组、OGD/R+QZG+CPA组。噻唑蓝(MTT)法检测各组细胞的生长活性;Hoechst 33258染色检测各组细胞凋亡率;Rh123染色检测各组细胞线粒体膜电位;Western印迹检测SHH、SHH通路膜受体蛋白(SMO)、B细胞淋巴瘤(Bcl)-2、Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白表达。结果QZG能明显降低实验动物血清中ALT和AST活性,明显降低白细胞介素(IL)-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α和MDA含量、肝组织及模型细胞中Bax蛋白表达,明显升高SOD活性、模型细胞生长活性及线粒体膜电位和肝组织及模型细胞中SHH、SMO、Bcl-2蛋白表达,并且明显抑制肝组织和模型细胞凋亡;CPA均可部分逆转这些作用,差异均具有统计学意义(均P<0.05)。结论QZG能改善肝组织中线粒体功能,抑制细胞凋亡,减轻大鼠肝组织I/R后的病理损伤和超微结构损伤,这些可能与激活SHH信号有关。