柴胡颗粒对发热大鼠体温、M1/M2型巨噬细胞极化及TLR4/NF-κB蛋白的作用机制

目的探讨柴胡颗粒对发热大鼠体温、M1/M2型巨噬细胞极化及Toll样受体(TLR)4/核因子(NF)-κB蛋白的作用机制。方法66只大鼠按照随机数字表法分为正常组、模型组、阿司匹林组、柴胡颗粒低、中及高剂量组,每组11只。除正常组外,其余大鼠均建立内毒素炎症发热大鼠模型,建模成功后,柴胡颗粒低剂量、柴胡颗粒中剂量及柴胡颗粒高剂量大鼠分别灌胃5.40、10.80及21.60 g/kg的柴胡颗粒,阿司匹林组灌胃0.081 g/kg的阿司匹林溶液,其余大鼠灌胃等量(约2 ml)的蒸馏水。采用电子体温计在建模前、建模后第8天、给药后2、3及4 h检测体温;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清中肿瘤坏死因子(TNF)-α、前列腺素(PG)E2及白细胞介素(IL)-1β水平,提取各组脾脏计算脾脏重量及脾脏指数;提取及分离巨噬细胞采用流失细胞检测巨噬细胞M1及M2极化情况;Western印迹检测巨噬细胞中NF-κB、TLR4及髓样分子因子(MyD88)蛋白表达。结果模型组活动、活跃程度均降低,饮水量升高,皮毛光泽度较差,粪便稀软。柴胡颗粒低、中、高剂量组及阿司匹林组活动及活跃程度有所升高,正常饮食,以高剂量柴胡颗粒组最佳。建模后,与正常组相比,其余组体温均显著升高(P<0.05),治疗后2、3及4 h时,模型组体温显著高于正常组,柴胡颗粒低、中、高剂量组体温均明显低于模型组,柴胡颗粒低、中、高剂量组组间体温逐渐降低,组间差异显著(P<0.05),柴胡颗粒高剂量组与阿司匹林组比较无显著差异(P>0.05);与正常组比较,模型组血清中TNF-α、PGE2及IL-1β水平、巨噬细胞M1型极化(CD80)、NF-κB、TLR4及MyD88蛋白水均明显升高,脾脏重量、脾体指数、巨噬细胞M2型极化明显降低(P<0.05);与模型组比较,柴胡颗粒低、中及高剂量组血清中TNF-α、PGE2及IL-1β水平、巨噬细胞M1型极化(CD80)、NF-κB、TLR4及MyD88蛋白水平显著降低,脾脏重量、脾体指数、巨噬细胞M2型极化(CD206)明显升高,各剂量组间存在显著差异(P<0.05),柴胡颗粒高剂量组与阿司匹林组比较无显著差异(P>0.05)。结论柴胡颗粒可通过促进M1型巨噬细胞向M2型极化,降低炎症反应从而降低发热大鼠体温,呈现剂量依赖性,高剂量效果最佳,研究机制与抑制TLR4/NF-κB信号通路激活相关。