氧化应激调控的DNA双加氧酶Tet2在机械应力调控的血管重建中的作用和机制

目的探究氧化应激调控的DNA双加氧酶Tet2在机械应力调控血管重建中的作用和机制。方法在体构建大鼠静脉移植、小鼠机械通气动物模型,研究两种机械应力条件下移植血管和肺组织中Tet2表达水平与组织损伤程度的关系。H&E染色评估血管内膜增生以及肺组织损伤情况;蛋白免疫印记以及免疫荧光检测Tet2以及靶分子表达及定位情况;划痕实验检测VSMCs迁移能力。Flexcell 5000力学加载系统对静脉VSMCs加载周期性张应变,研究静脉VMSCs在高张应变条件下Tet2表达水平、表型转换以及迁移变化情况。结果静脉移植术后1、2周血管内膜增生显著、机械通气后肺组织损伤评分升高,两种动物模型组织Tet2以及VSMCs收缩表型标志物均表达下调,肺组织中内皮细胞与上皮细胞的紧密连接分子occludins和ZO-1以及内皮细胞间血管内皮钙黏素表达含量显著降低。DHE染色显示,移植静脉以及高机械通气后肺组织氧化应激水平显著上升,免疫染色结果显示,静脉移植术和机械通气后Tet2表达水平降低而足体生成增多。机械牵拉显著降低VSMCs中Tet2、收缩表型标志物表达,促进足体生成和细胞迁移。结论机械应力下氧化应激水平显著上升,进而下调Tet2诱导血管VSMCs发生表型转换以及血管重建,Tet2有望成为静脉移植失败以及机械通气后肺损伤治疗的潜在靶点。