静水压力对BMSCs凋亡的影响及凋亡外囊泡特异性microRNA的研究

目的明确不同静水压力作用对BMSCs细胞凋亡的影响,并筛选压力作用下BMSCs凋亡囊泡表达的差异mi RNA。方法分离培养大鼠BMSCs并鉴定;细胞分为对照组、压力作用组(-40 k Pa,0.1 Hz作用1 h)、STS作用组(0.5μM,16 h),梯度离心法提取凋亡囊泡;CCK8检测细胞活性,流式细胞术检测细胞凋亡率,Western Blotting检测细胞凋亡标志物的表达及凋亡囊泡标志物的表达,NTA检测凋亡囊泡尺寸及浓度。采用高通量mi RNA测序技术对压力作用下BMSCs凋亡囊泡相关差异mi RNA进行筛选。结果采用全骨髓贴壁的方法分离培养的大鼠BMSCs可高表达干细胞表面标志物CD90、CD29、低表达造血细胞表面标志物CD34、CD45,并具有较强的克隆形成能力和多向分化的能力,为间充质干细胞。适当的静水压力处理可显著降低BMSCs细胞活性,促进其凋亡发生,并且-40 KPa压力作用下BMSCs凋亡率最高,且凋亡囊泡产生数量显著多于对照组。采用测序技术发现,-40 KPa压力作用产生的凋亡囊泡差异性表达mi R-183-5p和mi R-3473。结论适当的静水压力可以促进BMSCs的凋亡,并且-40 KPa压力作用下BMSCs凋亡囊泡差异性表达抗炎相关基因mmi R-183-5p和mi R-3473。