生理力学载荷维持衰老VSMCs合成表型

目的动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)引起的心脑血管疾病是一类典型的与衰老密切相关的增龄性疾病。衰老血管在多个层面发生退行性改变,血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)是血管中膜的力学响应细胞,在衰老进程中发生表型转换,进而导致细胞间通讯及功能发生变化。这些改变可影响AS的进展,但其在生理力学环境下的表型和功能改变尚不清楚。本研究旨在探讨周期性生理牵张刺激下衰老VSMCs的表型转换,初步了解力学载荷通过调控衰老VSMCs进而参与AS进展。方法原代VSMCs经过氧化氢诱导衰老,在确认合适浓度后q PCR结合免疫印迹筛选合适的表型标志物。进一步将原代VSMCs接种于Flexcell培养板,生长至融合状态后诱导衰老,Flexcell-4000T牵张系统10%幅度、1Hz加载12 h后收取细胞,免疫印迹检测标志物并半定量其表达水平。结果30μM的过氧化氢诱导原代VSMCs成衰老状态;定量筛选出衰老VSMCs高表达合成型标志物Col VIII、ZO-2,与免疫印迹结果一致;生理力学加载后衰老VSMCs维持上述合成型标志物高表达,并低表达收缩型标志物SMMHC、SM22α。结论生理环境下衰老VSMCs维持了力学响应能力,并通过表型和功能改变促进AS进展。