低血管剪切力通过METTL3乳酸化修饰促进LncRNA TUG1的m6A甲基化诱导内皮细胞铁死亡

目的表观遗传学修饰和铁死亡在动脉硬化中发挥重要作用。本研究探讨低血管剪切力处理下,蛋白翻译后修饰和Lnc RNA的m6A甲基化修饰对内皮细胞铁死亡的调控作用。方法不同血管剪切力(5、20 dyn/cm^(2))处理24 h的内皮细胞,通过PCR,WB、比色法、IF等检测L-LA、Kla-METTL3、Lnc RNA TUG1、Fe^(2+)、ROS、GPX4、MDA、JC-1等指标的表达。通过Co-IP、si RNA等检测KAT6A对METTL3的乳酸化修饰。通过m6A dot-blot、Me-RIP,RIP、RNA pull down、m6A-Select等检测METTl3、YTHDC1对Lnc RNA TUG1的m6A修饰。通过PCR、WB、IF等检测Lnc RNA TUG1对YAP的定位及表达影响。结果低血管剪切力增加Fe^(2+)、ROS、MDA的表达、降低JC-1、GPX4的表达。低血管剪切力促进KAT6A的表达、诱导METTL3乳酸化修饰,增加m6A甲基化催化能力。METTL3、YTHDC1促进Lnc RNA TUG1的m6A甲基化修饰、增加其稳定性。Lnc RNA TUG1抑制YAP磷酸化、促进其核易位,诱导内皮细胞铁死亡。结论低血管剪切力通过KAT6A促进METTL3乳酸化修饰,进而通过METTL3/YTHDC1依赖的m6A修饰机制增加Lnc RNA TUG1的表达并诱导YAP的核易位及表达,促进内皮细胞铁死亡。