CAR-NK靶向肺动脉高压引起右心室功能障碍中的心脏肌成纤维细胞

目的肺动脉高压(PH)引起的右心室压力过载会激活心肌成纤维细胞促进其增殖和胶原生成,从而造成心肌纤维化和舒张功能障碍。目前缺乏有效治疗右心室纤维化的药物和方法。通过设计一种嵌合抗原受体(CAR)NK细胞,靶向杀伤心脏中激活的成纤维细胞,进而缓解纤维化和改善功能。方法设计功能性CAR结构:包括细胞外结构域(信号肽和Sc Fv识别抗原FAP)、跨膜区和细胞内信号结构域3部分。慢病毒包装后转染NK-92细胞系,构建CAR-NK细胞。构建过表达FAP的H9C2细胞,与CAR-NK细胞共孵育测试其靶向杀伤水平。8周龄C57小鼠尾静脉注射1×10^(6)个聚苯乙烯微球,间隔1天,连续注射2周(共7次)。第14天进行超声心动图和血流动力学检测,取心脏进行马松染色以评估右心室纤维化。结果连续注射2周后,小鼠右心室收缩压维持在50 mm Hg,右心室壁出现间质性纤维化且舒张功能受损。转然后CAR阳性NK细胞比例约为50%,最大效靶比20∶1条件下,具有60%的杀伤率。结论持续的血栓栓塞型肺动脉高压会引起右心室舒张功能障碍和间质纤维化,CAR-NK细胞在体外能有效靶向杀伤表达FAP的肌成纤维细胞。