基于“以枢调枢”探讨芪石升降归元饮对胃食管反流病大鼠细胞自噬的影响

目的观察芪石升降归元饮对胃食管反流病(Gastroesophageal reflux disease,GERD)模型大鼠食管细胞自噬的影响。方法75只SD大鼠随机选取11只作为假手术组,其余大鼠采用食管支架置入术构建GERD大鼠模型,第3周将造模成功的大鼠按照随机数字表法分为模型组、西药组、芪石升降归元饮高、中、低剂量组。西药组予以枸橼酸莫沙必利分散片联合兰索拉唑肠溶片灌胃,芪石升降归元饮低、中、高剂量组予以相应浓度的芪石升降归元饮灌胃,期间观察并记录大鼠一般状态,疗程共2周。光镜下观察食管病理组织学结构,并进行食管黏膜损伤指数评分及食管炎性细胞分析,RT-qPCR及Western Blot检测食管下段组织中Beclin-1、P62、LC3Ⅱ mRNA及蛋白表达水平。结果GERD模型大鼠食管黏膜上皮细胞间隙增宽,固有层乳头延长,大量炎性细胞浸润,基底层过度增生,食管黏膜损伤指数及炎症评分增加。经西药和芪石升降归元饮高、中、低剂量干预后,食管黏膜结构基本恢复正常,鳞状上皮修复完整,基底细胞呈单层排列,未见明显炎性细胞浸润,食管黏膜损伤指数评分降低。与假手术组比较,模型组Beclin-1、LC3Ⅱ mRNA及蛋白相对表达量升高(P<0.01),P62 mRNA相对表达量降低(P<0.01);与模型组比较,西药组及芪石升降归元饮高、中剂量组Beclin-1、LC3Ⅱ mRNA相对表达量明显降低(P<0.05),西药组及芪石升降归元饮各剂量组P62 mRNA相对表达量均升高(P<0.01);芪石升降归元饮高、中、低三个剂量组组间比较,高、中剂量组Beclin-1、LC3Ⅱ mRNA降低较低剂量组更明显(P<0.05),高、中剂量组P62 mRNA升高较低剂量组更明显(P<0.05)。结论芪石升降归元饮可以有效修复GERD大鼠食管黏膜组织损伤,改善炎症浸润,其机制可能与芪石升降归元饮抑制食管细胞自噬,降低Beclin-1、LC3Ⅱ 表达,升高P62表达相关,且高、中剂量组抑制细胞自噬作用更强。