枸杞多糖预防兔视网膜色素上皮细胞光损伤凋亡机制研究

目的研究不同浓度枸杞多糖(Lycium barbarum polysaccharides,LBP)对光诱导损伤的兔视网膜色素上皮(Retinal pigment epithelium,RPE)细胞凋亡线粒体通路中相关蛋白分子表达量的变化,探讨枸杞多糖对兔PRE细胞光损伤预防保护作用可能的信号传导途径。方法通过流式细胞术(FCM)检测光照对兔RPE细胞凋亡率的影响,筛选最佳光照时间,通过光诱导建立兔RPE细胞光损伤模型,并进行预防性实验,分别用不同浓度的枸杞多糖于光照前8h对体外培养的兔PRE细胞进行干预,处理结束后0h、6h、12h、24h进行各相应指标检测,通过蛋白免疫印迹(Western blot)法分别检测Cyt-C、Caspase-9、Caspase-3蛋白分子表达量变化。实验组分为正常组、光损伤模型组以及不同浓度枸杞多糖(0.01,0.1,1mg/ml)干预组。结果与正常组比较,光照6h、12h、18h、24h兔RPE细胞凋亡率明显升高,且具有时效性,并筛选18h作为光损伤模型建立时间,光损伤组停止光照后兔RPE细胞内Cyt-C、Caspase-9、Caspase-3蛋白表达显著高于同时相内正常组细胞,说明停止光照后光损伤作用仍持续存在,且LBP有效抑制了同时相内兔RPE细胞内Cyt-C、Caspase-9、Caspase-3蛋白的表达。结论枸杞多糖能预防兔RPE细胞的光诱导损伤,具有一定的保护作用,且这一保护作用可能是通过抑制线粒体信号通路来实现的。