豫北地区148例乙型肝炎患者乙肝病毒多位点耐药突变分析

目的分析豫北地区2016—2018年乙型肝炎患者乙肝病毒(hepatitis B virus,HBV)逆转录酶基因与替诺福韦酯(tenofovir disoprox fumarate,TDF)、替比夫定(telbivudine,LDT)、阿德福韦(adefovir dipivoxil,ADV)、拉米夫定(lamivudine,LAM)、恩曲他滨(emtricitabine,FTC)、恩替卡韦(entecavir,ETV)等核苷(酸)类药物耐药相关的10个位点上的突变情况,为乙型肝炎患者合理用药和抗病毒治疗提供依据。方法提取乙型肝炎患者血清HBV DNA,针对YMDD突变位点,在保守区域设计特异性引物,采用PCR扩增方法结合双脱氧终止测序法,对PCR产物进行DNA测序,对测序成功的样本进行基因型分析,检测YMDD的突变情况,同时对核苷(酸)类药物耐药相关的10个位点上的突变情况进行分析。结果148例乙型肝炎患者标本中,其中C基因型为97.97%,耐药突变率为35.86%;B基因型为2.03%,耐药突变率为33.33%。耐药情况分析:拉米夫定LAM和恩曲他滨FTC耐药突变各32例,阿德福韦ADV和恩替卡韦ETV耐药突变各19例,替比夫定LDT耐药突变17例,替诺福韦酯TDF耐药突变1例。拉米夫定LAM和恩曲他滨FTC耐药突变中以M204V和M204I最常见,其中M204V突变常以M204V+L180M和M204V+L180M+V173L两种组合出现,而M204I突变则常单独出现或者以M204I+L180M组合出现;阿德福韦ADV耐药中以N236T+A181位碱基替换为主;恩替卡韦ETV耐药突变则在拉米夫定LAM和恩曲他滨FTC耐药基础上,以T184位和S202碱基替换为主;替比夫定LDT的耐药突变主要为M204I。结论豫北地区乙型肝炎患者基因型多为C型,耐药突变组合较为复杂,多药耐药基因突变比率较高,临床用药时要注意合理混合用药,防止耐药的发生。