摘要
探讨定量检测BCL-2基因在神经母细胞瘤(NB)的表达和运用ELISA方法检测神经母细胞瘤患儿外周血VEGF的表达,及其与神经母细胞瘤发展、预后的关系。方法:收集神经母细胞瘤患儿手术切除标本16例,-80℃保存,其中化疗前标本8例、化疗后标本8例,并在设定时间采集患儿外周血,离心收集血浆-80℃保存。应用实时荧光定量PCR检测所有标本中BCL-2、N-MYC、MDR1基因的mRNA表达情况,同时收集相应肿瘤标本的石蜡切片,进行免疫组化检测。运用ELISA方法检查神经母细胞瘤患儿外周中VEGF、NSE、SF的表达。采用INSS标准对神经母细胞瘤患儿进行临床分期,所有组织标本均进行Shimade分型。运用统计学方法比较Ⅰ-Ⅱ及ⅣS期与Ⅲ-Ⅳ期、FH型与UFH型、化疗前后神经母细胞瘤组织中BCL-2表达量的多少;分析BCL-2的表达与N-MYC基因和耐药基因表达的相关性;及化疗、手术前后外周血VEGF、NSE、SF的表达变化;BCL-2、VEGF、NSE、SF与神经母细胞瘤发生、发展、预后的关系。结果:BCL-2基因在神经母细胞瘤组织中的表达量Ⅲ-Ⅳ期明显高于Ⅰ-Ⅱ及ⅣS期(P<0.05)、UFH型明显高于FH型(P<0.05)、化疗后高于化疗前的表达(P<0.05),免疫组化结果与PCR结果基本一致;BCL-2的表达与N-MYC的拷贝数呈明显正相关(P<0.05),与耐药基因的表达无明显相关(P>0.05);BCL-2、VEGF的表达量与神经母细胞瘤患儿的预后呈负相关(P<0.05)。结论:BCL-2作为一种重要的凋亡调控基因,运用实时荧光定量PCR检测其在神经母细胞瘤中的表达量,可作为判断神经母细胞瘤生物学特性和预后的重要指标。VEGF作为外周血中的肿瘤标志物,可作为化疗疗效监测及预后判断的重要指标。
