摘要
采用C57BL/6J小鼠及含有突变基因cDNA序列的转基因载体建立先天性白内障转基因动物模型。方法:利用含有突变型EPHA2基因cDNA全长的转基因载体,经限制性内切酶对载体线性化后注入小鼠受精卵雄原核,后将受精卵植入代孕母鼠子宫。在转基因载体序列选取两个跨功能片段设计2对鉴定引物用于整合鉴定。对转基因阳性小鼠与阴性对照小鼠晶体组织做mRNA表达分析,证实转基因在整合阳性小鼠晶体组织确有特异性表达。结果:首建系小鼠共75只,经整合鉴定确定3只转基因阳性founder小鼠,经与野生C57BL/6J小鼠杂交传代后,产生3代共279只小鼠,其中阳性鼠106 只,阳性率为37.99% 。所有转基因阳性鼠均经裂隙灯检查诊断为先天性白内障表型。提取转基因阳性小鼠晶体组织总RNA,经RT-PCR检测结果为阳性。结论:先天性白内障转基因小鼠动物模型成功建立,转基因在小鼠晶体组织有特异性表达。
