摘要
探讨CysC对巨噬细胞内胆固醇逆转运及ABCA1的影响,并探讨其作用机制。方法:用CysC及不同浓度的CysC单克隆抗体干预处理巨噬细胞,氧化修饰型低密度脂蛋白(ox-LDL)被诱导分化为巨噬细胞;油红0液染色观察泡沫细胞的形成;ABCA1siRNA和si-NC转染巨噬细胞;RT-qPCR和Western blot检测ABCA1mRNA和蛋白表达;高效液相色谱法(HPLC)检测细胞内胆固醇酯含量;[3H]标记检测胆固醇流出率。结果:与对照组比较,CysC组泡沫细胞大量形成,CysC单抗能够剂量依赖性抑制泡沫细胞的形成,同时抑制THP-1源性巨噬细胞内胆固醇的积聚,巨噬细胞内CE/TC比值明显降低,细胞内胆固醇流出率增加(P<0.05)。此外,本研究结果显示,与对照组相比,CysC组细胞中ABCA1mRNA表达显著减少(P<0.05),与CysC实验组相比,CysC单抗组显著上调细胞内ABCA1mRNA表达水平(P<0.05)。而当ABCA1 SiRNA转染时,CysC单抗抑制的细胞内CE/TC比值明显增加(P<0.05)。同时,ABCA1沉默明显抑制了CysC单抗诱导的胆固醇外流(P<0.05)。结论:CysC及CysC单抗可通过干预ABCA1mRNA的表达水平来影响细胞内胆固醇代谢进程,这为将来研发降低CysC水平,稳定动脉粥样斑块的药物提供了理论基础,为动脉粥样硬化的预防和治疗提供了新的研究思路。
