摘要
宿主基因micro RNA miR-138在神经系统中高效表达,它通过靶向病毒ICP0的信使RNA来抑制单纯疱疹病毒herpes simplex virus 1(HSV-1)裂解循环的各类基因,从而促进病毒在宿主体内潜伏。然而,我们发现过表达miR-138仍然可以抑制病毒的裂解,因此我们怀疑miR-138是否还有其他靶点来抑制HSV-1的复制过程。方法:我们利用细菌人工染色体技术(BAC)将miR-138基因和ICP0上的3’UTR进行编辑,获得重组病毒WT-IE-138,WT-IE-138M,M138-IE-138和M138-IE-138M。在N2A细胞中进行培养,空斑试验观察独立于ICP0的情况下病毒的复制情况;进一步通过小鼠感染实验,qPCR技术检测小鼠三叉神经中病毒的复制基因。结果:结果显示,空斑试验发现独立于ICP0,miR-138仍能抑制病毒复制。通过RT-qPCR检测发现M138-IE-138M病毒基因的复制水平明显高于M138-IE-138,说明miR-138确实通过靶向病毒基因和未知宿主基因促进HSV潜伏,为后续研究提供有力证据。结论:miR-138还有其他靶点来抑制HSV-1的复制过程,从而造成病毒在宿主体内的长期潜伏。
