摘要
以体外培养的胰腺癌细胞为研究对象,探讨白藜芦醇对胰腺癌PANC-1 细胞株放疗敏感性的影响及其机制。方法:体外培养胰腺癌 PANC-1 细胞株,显微镜下观察细胞形态,定期更换培养基及传代,取对数生长期细胞实验。设置空白对照组 A、单纯用药组 B(白藜芦醇 50μmol/L)、单纯照射组 C(6MV 直线加速器 照射剂量 2Gy)、白藜芦醇联合照射组 D(白藜芦醇 50μmol/L + 6 MV 直线加速器 照射剂量 2Gy)(1)采用 CCK-8 法测定各组 OD 值,计算细胞抑制率。(2)Hoechst 33258荧光染色观察细胞核形态学变化。(3)蛋白印迹法检测各组Beclin1蛋白的表达。结果:(1)联合照射组 D 与单因素干预组(B 组与 C 组)相比,细胞抑制率明显提高,差异有统计学意义(P<0.05),金正均法表明两种干预因素联合对胰腺 癌 PANC-1 细胞有协同抑制作用。(2)B 组、C 组中细胞核呈现染色质边集、核固缩、核片断化,伴随典型凋亡小体的形成,A组阴性对照组细胞数较多,凋亡细胞少,细胞核呈弥散、均匀蓝色荧光,经联合处理后,D组细胞数逐渐减少,凋亡细胞明显增多,甚至出现大片细胞脱落形成的细胞脱失区。(3)Western blotting 检测发现 B、C、D 三组均可使Beclin1 蛋白表达增加,且D组蛋白表达更为明显,免疫荧光后细胞挛缩,Beclin1 在胞浆中所占比例更高,与 B 组、C 组灰度值比较,差异有统计学意义(P<0.05)。
