摘要
研究细胞外酸性微环境在肝细胞癌细胞增殖、迁移、侵袭、凋亡的作用,探索研究肝细胞癌发生发展的细胞分子机制,寻找对肝细胞癌的新的治疗靶点,对提高肝细胞癌的治疗水平。方法:采用MTT细胞增殖实验检测不同酸碱性培养基对SMMC7721、HepG2、SK-HEP-1肝癌细胞株增殖的影响。采用划痕法、Transwell方法研究不同酸碱性培养基对肝癌细胞株迁移和侵袭能力的影响。运用流式细胞仪AnnexinV-FITC/PI检测不同酸碱性培养基对肝癌细胞株早期凋亡的影响。运用real time RT-PCR技术和Western -Blot技术检测不同酸碱性培养基对SMMC7721肝细胞癌细胞株的Ki67和PCNA mRNA和蛋白质的表达情况。结果:与对照组(pH 7.2)相比,酸性组(pH 6.4、6.6)均有不同程度的抑制作用(P<0.05),而酸性组(pH 6.8)促进细胞的增值(P<0.05);碱性组(pH7.6、7.8、8.0)也有不同程度的抑制作用(P<0.05)。与对照组(pH 7.2)相比,酸性组(pH 6.8)对SMMC7721、HepG2和SK-Hep1细胞迁移距离、迁移数量和侵袭数量明显增加(P<0.05),而碱性组(pH 7.6)迁移距离、迁移数量和侵袭数量无明显差异(P>0.05)。与对照组(pH 7.2)相比,酸性组(pH 6.8)和碱性组(pH 7.6)的各种细胞早期凋亡率都无明显差异(P>0.05)。结论:通过本研究,肝癌细胞外酸性(pH 6.8)微环境可以促进肝癌细胞的增殖、迁移和侵袭,其机制可能与微酸环境下肝癌细胞Ki67、PCNA mRNA和蛋白质表达上调有关,肝癌细胞外酸碱微环境肝癌细胞的凋亡影响不明显,为肝细胞癌的治疗提供新的药物治疗靶点。
