高糖高脂损伤的H9c2细胞模型的探讨

探讨高糖高脂(HGHL)在不同浓度和不同作用时间对H9c2细胞的影响,建立糖尿病心肌损伤研究常用的H9c2心肌细胞高糖高脂损伤模型。方法 用高糖(33mmol/L)联合不同浓度(0.05、0.1、0.2mmol/L)棕榈酸(PA)干预细胞24h,选择高糖联合0.1mmol/L的PA分别干预H9c2细胞12、24、36h,采用CCK-8法检测细胞活力,试剂盒测定细胞上清液乳酸脱氢酶(LDH)水平,HE染色观察高糖联合不同浓度PA干预细胞不同时间后的形态学改变。结果 与control组相比,vehicle组干预细胞24h,细胞活力及LDH活性无统计学差异,高糖联合0.05、0.1、0.2mmol/L PA干预细胞24h,细胞活力逐渐下降,LDH活性逐渐升高(P<0.01),高糖联合0.1mmol/LPA干预细胞12、24、36h,细胞活力逐渐下降(P<0.01),12h组LDH活性无统计学差异,而24h和36h组LDH活性均显著升高(P<0.01)。HE染色结果显示,与control组相比,随着PA浓度的升高和干预时间的延长,细胞逐渐失去正常形态,缩短变胖,细胞核固缩碎裂,细胞死亡增多。结论 高糖高脂对H9c2心肌细胞具有损伤作用,随着PA浓度的增加及干预时间的延长,损伤逐渐加重,可采用33mmol/L的高糖联合0.1mmol/L PA干预H9c2心肌细胞24h建立高糖高脂损伤模型。