摘要
探讨I型胶原α1链(COL1A1)与E-cadherin(E-C)对三阴型乳腺癌(TNBC)细胞生长、侵袭、转移的影响,探讨其与TNBC临床病理特征的关系。方法 通过免疫组化的技术测定COL1A1的表达状态,采用慢病毒转染技术构建COL1A1低表达的乳腺癌细胞系,利用exoRasy Maxi kit提取细胞外泌体,将外泌体与成纤维细胞共培养,采用PCR法测定E-C的基因表达,Western blot法检测E-C的蛋白表达,综合分析COL1A1表达状态与E-C的表达关系,从而探讨COL1A1通过E-C介导TME的过程及在三阴性乳腺癌的作用。结果 RT-pCR检测结果表明:与阴性对照组相比,外泌体与成纤维细胞中共培养E-C基因表达水平表达量显著下调(p<0.05),阴性对照组与实验组中E-C mRNA表达水平分别为0.580±0.124与0.958±0.213,与阴性对照组相比,实验组中E-C mRNA表达量明显下调(p<0.05)。Western blot法检测显示,HKF细胞与空白对照组中E-C蛋白表达水平分别为0.804±0.051与0.420±0.046,与正常的成纤维细胞相比,空白对照组中E-C蛋白表达量显著下调(p<0.05),阴性对照组与实验组中E-C 蛋白表达水平分别为0.500±0.080与0.676±0.037,与阴性对照组相比,实验组中E-C mRNA表达量显著减少(p<0.05)结论 COL1A1的过度表达和E-C的表达降低相结合,或比单一标志物更能预测三阴型乳腺癌的预后。
