摘要
建立多重PCR分子技术鉴定小儿肺咳颗粒中鸡内金真伪的方法。方法 采用甲醇预沉淀与CTAB结合法提取DNA,根据家鸡、麻鸭、家鹅的线粒体基因序列设计和筛选引物,建立基于特异性引物检测鸡内金的多重PCR方法,并进行方法学考察,用于市售小儿肺咳颗粒中鸡内金的真伪鉴别。结果 筛选得到的鸡、鸭、鹅内金DNA分别在94 bp,123 bp和155 bp处产生清晰明亮条带且未发现非特异性扩增,引物最佳组合浓度PGD: PAP: PAA为0.28: 0.16: 0.08 μM,PCR循环33次得到的条带清晰且无非特异性扩增,该方法特异性良好,灵敏度达1 ng/μL,该方法检测不同厂家10个批次小儿肺咳颗粒样品,发现1个批次检出有鹅内金掺伪,检出率为10.0%。结论 多重PCR分子技术鉴定方法可以很好地监控含鸡内金成方制剂的质量。
