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HPLC-MS/MS法测定人体血清中7种B族水溶性维生素浓度及应用

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摘要 建立同时测定人血清中水溶性维生素VB1、VB2、VB3、VB5、VB6-C00H、5-MTHFA、VB12的液相串联质谱法。具体方法是 选择同位素标记的维生素VB1、VB2、VB3、5、VB6-C00H、5-MTHFA、MMA等做内标,用6%BSA溶液做为新鲜血清的替代基质溶剂,对正己烷进行化学萃取,按质谱分析法则选择ESI的正离子MRM模型,按色谱分析法柱采用MerCkHS-C18柱(4.6×mm,),流动的A液为0.5%甲酸水+0.5%甲酸铵+水溶液(1:1:8),B液为纯甲醇,流量以0.6ml/min进行梯度弥散洗脱。结果 维生素VB1、维生素VB2、维生素VB3、维生素VB5、维生素VB6-C00H、5-MTHFA、VB12的质量浓度在范围内线性良好,其测定的批间与批内变异系数,稀释回收率、添加回收率及基质效应评价等均符合检测要求。结论 经过液相串联质谱仪的技术验证,我们建立了一种快速、精准、特异性强的分析方法,它能够一次性从水溶性维生素中有效地提取出有价值的物质,并且能够在临床实践中有效地检测出VB1、VB2、VB3、VB5、VB6-C00H、5-MTHFA和VB12的质量浓度。
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