阳离子脂质体转染条件对转染效率的影响

分析不同浓度的四环素、阿奇霉素、氯霉素和庆大霉素和不同PH值、细胞状态对脂质体Lipo2000转染效率产生影响。方法 1.HeLa细胞转染前24小时在MEM培养基中分别加入不同种类不同浓度的抗生素,48小时后根据GFP阳性细胞数量分析抗生素对转染的影响。2.HeLa细胞转染前24小时放置在不同PH值的MEM培养基中,根据GFP阳性细胞数量分析不同PH值对转染的影响。3.观察 对在室温放置不同天数的HeLa细胞转染率,分析不同细胞状态对转染效率的影响。结果 1.不同种类抗生素以及同种抗生素不同浓度均对脂质体转染效率的敏感性不同,用庆大霉素作为抗生素转染效率最佳,四环素转染效率最差。2.不同转染细胞浓度条件下在PH=8.0碱性培养基中转染效率最佳。3.室温放置的细胞脂质体LipofectamineTM2000的转染效率显著降低。结论 使用庆大霉素抗生素以及在PH值8.0、细胞状态最佳条件下转染效率敏感性最高。