摘要
针对CAR-T细胞注射液工艺中用到的Dynabeads CD3/CD28的磁珠残留,建立一种灵敏且稳定可靠的检测方法。CAR-T细胞和细胞碎片本身会对Dynabeads磁珠的检测造成很大干扰,本研究首先需要用合适的溶剂裂解后去除细胞样品和细胞碎片,通过磁力架吸附住需要检测的磁珠残留,再采用光阻法,当液体中的微粒通过一窄细检测通道时,由于被微粒阻挡而减弱,由传感器输出的信号降低,这种信号变化与微粒的截面积大小相关,通过Beckman Coulter的HIAC 9703+不溶性微粒分析仪,进而检测CAR-T细胞注射液中的磁珠残留。经预验证,CAR-T细胞注射液中样品的专属性灵敏,重复性的RSD为9%,中间精密度RSD为12%,加标回收率在83%~101%,以及在室温放置3h,稳定性的回收率在95%~99%。本方法简便、灵敏、准确可用于CAR-T细胞注射液中用到的Dynabeads CD3/CD28磁珠残留的质量评估。
