Ad36-Exosome改善脂肪细胞和肝细胞胰岛素抵抗的作用

研究腺病毒36型(Ad36)感染的人脂肪源性间充质干细胞(hADSC)分泌的外泌体(Exosome)对肝细胞和脂肪细胞葡萄糖摄取的影响。方法 培养人脂肪源性间充质干细胞(hADSC),用鸡尾酒法诱导成脂,油红O染色检测其定向分化为成熟脂肪细胞的能力。用5MOI Ad36感染hADSC后提取外泌体。电镜检测和NTA实验鉴定外泌体大小,采用western-blot的方法检测外泌体标记基因TSG101、CD9、CD63、CD81鉴定外泌体。用Ad36感染的hADSC分泌的外泌体干预肝细胞和脂肪细胞,利用葡萄氧化酶法检测第0、2、4、6、8天培养基中葡萄糖的含量,并以培养皿中细胞总蛋白的含量进行校正。结果 油红O染色结果显示,hADSC可以定向诱导为成熟的脂肪细胞。Ad36可以诱导A549细胞形成细胞病变效应。Ad36感染hADSC细胞后脂肪细胞内甘油三酯合成增多。电镜实验和NTA实验结果显示,分离得到的Ad36感染hADSC细胞分泌的外泌体大小在100nm左右。Western-blot检测外泌体标记基因结果显示外泌体提取成功。外泌体干预肝细胞和脂肪细胞后的第2、4、6、8天与第0天未干预组相比,培养基葡萄糖浓度降低且差异有统计学意义(P<0.05)。结论 Ad36可能通过外泌体来增加肝细胞和脂肪细胞的葡萄糖摄取,进而改善胰岛素抵抗的作用。