摘要
研究正常妊娠和子痫前期胎盘组织中GKN1mRNA及蛋白质的表达情况,通过体外细胞学实验探讨GKN1对滋养细胞侵袭、迁移和增殖的影响以及GKN1与JAK-STAT信号通路的关系研究了解其发挥作用的生物学机理,旨在为研究子痫前期的发病机制以及早期诊治提供新思路。方法 收集正常妊娠和子痫前期胎盘组织各30例,检测GKN1的表达;低氧1%环境下培养HTR-8/Svneo细胞在体外模拟子痫前期进行验证;通过小干扰RNA转染处理来敲降GKN1,然后通过MTT实验和EdU实验检测对增殖能力的影响,Transwell实验检测侵袭能力以及划痕实验检测对细胞迁移能力的影响;Westernblot检测敲降GKN1对低氧条件下HTR-8/Svneo细胞中p-JAK2、JAK2、p-STAT3和STAT3的表达变化的影响。结果 与正常妊娠比较,子痫前期胎盘组织GKN1mRNA表达水平和蛋白表达水平明显增加,差异有统计学意义(P<0.01)。免疫组织化学结果显示,子痫前期胎盘组织中GKN1的表达增加。HTR-8/SVneo细胞在低氧条件下培养,GKN1的mRNA和蛋白表达水平均显著增加(P<0.01)。GKN1敲低导致低氧条件下HTR-8/SVneo细胞的增殖能力增加,迁移和侵袭能力显著加强。GKN1敲低时低氧条件下的HTR-8/Svneo细胞中p-JAK2和p-STAT3蛋白质表达水平增加,JAK-STAT信号通路被激活。结论 子痫前期患者胎盘中GKN1在翻译及转录水平表达增高,GKN1对滋养细胞的增殖、迁移和侵袭有抑制作用,由此推测GKN1可能通过调控JAK-STAT信号通路参与子痫前期的发病。
