益气活血方体外诱导大鼠骨髓间充质干细胞向神经细胞分化

目的:探讨益气活血方体外诱导大鼠骨髓间充质干细胞向神经细胞分化的作用。方法:采用密度梯度离心法分离获取SD大鼠骨髓单个核细胞层,将细胞经过传代培养使细胞得到扩增和纯化,用流式细胞仪鉴别。用益气活血方联合二甲亚砜(DMSO)、丁羟茴醚(BHA)和β-巯基乙醇(BME)等对碱性成纤维生长因子(bFGF)预诱导的MSCs诱导向神经细胞定向分化。用免疫细胞化学方法检测诱导1h、3h后巢蛋白(nestin)的表达,诱导5h后神经元特异性烯醇化酶(NSE)和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达,鉴定分化细胞的类型,并计数MSCs分化的各种细胞的阳性率。结果:益气活血方体外诱导MSCs1h、3h后分化为nestin免疫细胞阳性率为45.5%±3.4%和38.3%±1.8%,诱导5h后NSE和GFAP免疫细胞阳性率为82.3%±2.4%、12.1%±1.6%,与对照组相比有极显著性差异(P<0.01)。结论:成年大鼠骨髓MSCs可以在体外培养扩增,益气活血方有体外定向诱导骨髓间充质干细胞向神经细胞分化的作用。