真菌性角膜炎常见致病菌株——镰刀菌的AFLP指纹图谱分析

目的采用AFLP对镰刀菌进行基因分型。方法对镰刀菌分离、纯化、重新鉴定后,用CTAB法提取其DNA。经EcoRI和MseI双酶切,对酶切片段进行预扩增和选择性扩增。扩增后的产物经6%聚丙烯酰胺凝胶电泳,银染成像。结果用20株镰刀菌作材料,筛选出3对多态性较高、带型质量较好的AFLP引物,分别是E-TCM-CAA,E-TAM-CTT,E-TAM-CAC。各菌株间的相似率为74%～90%,在SM=0.74(74%)的相似性水平上,镰刀菌明显地分为2种。14株茄病镰刀菌种内可分为9型,6株串珠镰刀菌种内可分为4型。结论AFLP可用于真菌性角膜炎常见致病菌株即镰刀菌的基因分型。