狗脊蕨凝集素的分离纯化与部分性质

Purification and Characterization of Woodwardia jatonica Lectin

狗脊蕨叶组织经磷酸缓冲液抽提 ,硫酸铵分级沉淀 ,DEAE Sepharose(fastflow)离子交换层析和SephadexG 10 0分子筛层析 ,获得具有凝集活性的狗脊蕨凝集素。用PAGE和SDS PAGE检测均显示 1条蛋白带 ,提示狗脊蕨凝集素分子只有一个亚基。SephadexG 10 0层析和SDS PAGE测得其相对分子质量在 2 0kD左右。该凝集素对红细胞有种属专一性 ,其凝集活性可被木糖、卵粘蛋白所抑制。狗脊蕨凝集素对热相当稳定 ,以 10 0℃温度加热 10min仍保存部分凝集活性。凝集活性不依赖于金属离子Mg2 + 、Ca2 + 、Mn2 + 。它的中性糖含量为 3.1% ,Phe含量较高 ,His含量较低 ,不含Tyr和Pro。