Sart3基因原核表达载体的构建及其在大肠杆菌中的表达

采用RT-PCR技术从人胎盘组织中扩增出T细胞识别的鳞状细胞癌抗原3(Sart3)基因片段,定向克隆入质粒pEGFP-N1,进行酶切、PCR和测序鉴定;构建重组原核表达载体Sart3/pTYB1,并转化大肠杆菌进行表达。结果目的基因经酶切、PCR鉴定与预期相符,测序结果显示目的基因与GeneBank登陆的序列完全一致;工程化大肠杆菌经IPTG诱导表达约100 kD的目的蛋白。为蛋白纯化和进一步研究其功能、寻找肿瘤抗原肽及制备肿瘤疫苗奠定了实验基础。