川芎嗪及大蒜素对剪应力诱导的内皮细胞分泌血管性血友病因子与血小板聚集的影响

模拟体内血管壁 血液 血流相互作用 ,观察川芎嗪和大蒜素对剪应力诱导的血管内皮细胞 (ＥＣ)分泌血管性血友病因子 (ｖｏｎＷｉｌｌｅｂｒａｎｄｆａｃｔｏｒ ,ｖＷＦ)以及血小板聚集的影响 ,为川芎嗪和大蒜素的临床应用提供实验依据。一、材料与方法1 人脐静脉内皮细胞 (ＨＵＶＥＣｓ)培养 :采用胶原酶消化法分离细胞 ,并将其接种在特制的直径为 45ｍｍ的光学玻璃片上 (预先用 0 5%的明胶包被 ) ,细胞种植密度 (4～ 9)× 1 0 5个 /玻片。以原代细胞进行剪切实验。2 剪切实验 :实验按剪切时间分为 1 0ｍｉｎ组、2 0ｍｉｎ组 ;按药物分为空白对照组、川芎嗪 (0 66ｍｍｏｌ/Ｌ)、大蒜素 (1 68ｍｍｏｌ/Ｌ)组 ;2种分组方法组合后实验共分为 6组。将枸橼酸钠抗凝的健康成年人血离心得到富含血小板的血浆 (ＰＲＰ) ,再分别加入一定浓度的川芎嗪注射液 (北京第四制药厂 )、大蒜素注射液 (中日友好医院药学部 ) ,对照组加磷酸盐缓冲液 (ＰＢＳ) ,2 0℃温育 5ｍｉｎ ,得到剪切样品。用平板 平板剪切装置 (ＨＡＡＫＥＲｏｔｏｖｉｓｃｏＲＶ2 0 /ＣＶ1 0 0 )模...