TPA处理牛精子后蛋白激酶C(α及β)的膜向转移及活性变化

The Translocation of Cytosolic PKC(α,β) to the Plasma Membrane and Change of PKC Activity after Treatment of TPA in Bovine Sperm

目的 :研究 TPA处理牛精子后 ,蛋白激酶 C(α、β)的膜向转移及活性变化。方法 :TAP处理后采用 West-ern blotting观察 PKC的两种亚型 (α、β)的膜、浆各部分含量变化 ,并测定 PKC在浆、膜的活性变化。结果 :以 0 .1,1,10 ,10 0 ng/ ml不同浓度 TPA处理牛精子后 ,浆中 PKC(α、β)逐渐减少 ,而膜中的则逐渐增多 ;相同浓度的 TPA在处理不同时间的条件下 ,免疫印迹可见浆中的 PKC逐渐增加 ,而膜中的 PKC逐渐减少 ;10 0 ng/ ml的 TPA处理牛精子 5 min后 ,浆内 PKC比活性降低 ,膜部分 PKC比活性升高。结论 :TPA处理牛精子后 ,PKC的两种亚型 (α、β)的含量具有膜向转移 ,并有时间和浓度依赖性 ,同时也有活性的改变。

Objective:To study the translocation of cytosolic PKC(α,β) to the plasma membrane and change of PKC activity after treatment of TPA in bovine sperm Methods:The changes of PKC(α,β)concents between cytosolic and plasma membrane were observed by western blotting;PKC activity was determined by Takia methods. Results: PKC in cytosolic fraction decreased while that of plasma membrane increased after treatment of TPA in various concentration and time; The activity of PKC(α,β) in plasma membrane had been inc...