摘要
α-乙酰乳酸脱羧酶在啤酒生产中能加快啤酒成熟,有重要的应用价值。本研究将枯草芽孢杆菌启动子P43克隆到质粒pUC19-ALDC中的α-乙酰乳酸脱羧酶基因之前,得到重组质粒pUC19-P43-ALDC。重组质粒pUC19-P43-ALDC与质粒pMLK83-BN同源重组,筛选得到枯草芽孢杆菌整合质粒pMLK83-ALDC。用此整合质粒转化枯草芽孢杆菌1A751,挑选出新霉素抗性且无淀粉酶活性的重组菌株。此菌株用LB培养基在37℃、220r/min摇瓶培养过夜,测得α-乙酰乳酸脱羧酶活力为15.6U/mL,说明整合的α-乙酰乳酸脱羧酶基因能够在重组菌株中稳定传代和表达。本研究首次在枯草芽孢杆菌中用整合型的方式重组表达了α-乙酰乳酸脱羧酶,提出了一种有潜力的生产α-乙酰乳酸脱羧酶的新方法。
α-acetolactate decarboxylase plays an important applied role in speeding up the maturation of beer in beer production. In this study we obtained the recombinant plasmid pUC19-P43-ALDC by cloning promoter P43 of Bacillus subtilis in the front of α-acetolactate decarboxylase gene in plasmid pUC19-ALDC, which was ho-mologous recombinated with plasmid pMLK83-BN and obtaining the integration plasmid pMLK83-ALDC of Bacillus subtilis. Then we transformed the integration plasmid into Bacillus subtilis 1A751, and se...
出处
《基因组学与应用生物学》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第5期843-848,共6页
Genomics and Applied Biology
基金
广西科学研究与技术开发计划项目(桂科产10100021-2)资助
关键词
Α-乙酰乳酸脱羧酶
枯草芽孢杆菌
整合表达
同源重组
α-acetolactate decarboxylase
Bacillus subtilis
Integrative expression
Homologous recombination