伊氏锥虫PCR诊断技术的研究进展

自八十年代以来,随着PCR技术的兴起,PCR诊断亦逐步应用到医学、兽医学的病原诊断,并具有独到的优越性。目前用PCR方法诊断伊氏锥虫病尚属空白,本研究旨在建立伊氏锥虫病诊断方法。 我们参照国外有关报导,设计并合成DNA扩增引物一对:5′-TGCAGACGACCTGACGCTACT-3′,5′-CTCCTAGAAGCTTCGGTGTCCT-3′。样品处理采用虫血加裂解液,离心后弃上清,用PCR缓冲液洗后,可直接用于DNA扩增:每个样品加水至10μl,加石腊油覆盖,100℃20分钟后,置反应温度93℃。