应用FCM纯化外周血和骨髓某些细胞亚群的技术问题

在研究人外周血T细胞主要功能亚群及其性质和CD10单抗与造血细胞的关系的过程中,需要用CD4^+,CD8^+,CD10^+,NK等单一纯化的亚群细胞做实验。目前,纯化细胞的方法有梯度密度离心法和离心淘洗法,这两种方法只能把不同体积或比重的细胞分离出来,而对那些体积和比重相差无几但在细胞表型或细胞内部成分有差别的细胞亚群就无能为力。流式细胞术(flowcytometry,FCM)分离纯化细胞的技术正好弥补了它们的不足。FCM的特点是对细胞多参数同时分析。特别是用一些单克隆抗体对细胞进行免疫染色。