蛋白质冰冻电子显微方法研究

自从A.Klug和P.Unwin等人创立了蛋白质电子晶体学,并使用低剂量技术减少辐射损伤之后,生物大分子晶体结构的研究取得了很大进展。但电子剂量的减少,象的信噪比迅速下降,从而影响成象的分辨率并造成图象处理上的困难。Hayward和Glaeser首先使用低温冷冻的方法克服辐射损伤的问题,并得到很好的效果。放射化学指出:有机材料在低温下,对离子辐射有大得多的抗性(resistance),从而大大减少辐射损伤的影响。本文介绍我们应用冰冻电子显微学研究蛋白质晶体的实验方法。材料与方法:蛋白质薄晶是使用牛肝过氧化氢酶,采用NaCl透析法获得。