枯草芽孢杆菌植酸酶基因在大肠杆菌中的表达及其对酶热稳定性的影响

采用PCR法，获得不含有信号肽序列的来源于枯草芽孢杆菌的植酸酶phyC基因的非融合和融合表达片段，分别构建带有T7lac启动子的大肠杆菌的植酸酶pET30NFphyC和pET30FphyC表达载体，并转入大肠杆菌BL21(DE3)。大肠杆菌分别在30℃和25℃经IPTG诱导后实现了植酸酶的表达，非融合和融合植酸酶的表达量分别约占菌体总蛋白的13％和15％，分子量分别为40．13kDa和43．27kDa。表达产物具有植酸酶的生物学活性，非融合植酸酶和融合植酸酶的最适反应温度分别为50℃和75℃，经90℃处理10min，残留酶活性分别为37℃时的31．9％和75．7％。分析表明，含13个氨基酸残基的融合片段有助于植酸酶的表达和酶热稳定性的提高。