摘要
以优异小麦品种“小偃6号”的高分子量麦谷蛋白亚基 (high molecular weight glutenin subunit.HMW—GS)1Bxl4和lBvl5为混合抗原,免疫BALB/c小鼠.将其脾细胞和骨髓瘤细胞(SP2/0)融合,采用间接ELISA 筛选与有限稀释法克隆,建立了一株稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞系.单抗Ig亚类为IgGl.蛋白质免疫印迹实验结果表明:该单抗能与小麦所有HMW-GS发生强烈反应。而与醇溶蛋白和低分子量谷蛋白亚基不反应.能与普通小麦近缘种粗山羊草、硬粒小麦、黑麦和大麦的高分子量贮藏蛋白发生反应:而与燕麦、玉米、高粱、谷子和水稻等禾谷类作物贮藏蛋白不发生反应.另外,利用原核表达载体pGEX-4T-1,将HMw—GSN 端、中央重复区和C 端3个结构域分别在E.coli BL2l中融合表达.免疫印迹实验结果表明,该单抗识别的抗原决定簇应位于中央重复区中的六肽和九肽之中.对该单抗的抗原决定簇及其在小麦品质育种中的运用进行了讨论.
出处
《中国科学（C辑）》
CSCD
北大核心
2004年第4期310-316,共7页
Science in China(Series C)
基金
科学技术部转基因专项(批准号:J99-A-018)
"863"计划项目(批准号:2003AA207090)资助
