密码子修饰增强乳头瘤病毒晚期蛋白表达的研究

目的观察密码子修饰对乳头瘤病毒衣壳蛋白基因表达的影响。方法以密码子改变影响乳头瘤病毒晚期蛋白的表达为依据，以人类常用密码子替代野生型密码子构建HPV6b L1(HLl)、HPV6b E7 N-端(HL1E7I)、HPV6b E7 C-端(HL1E7 Ⅱ)和BPV1 L2 （HBL2)质粒，转染真核细胞系，以免疫荧光、免疫印记、电镜、流式细胞分析、ELISA观察相应蛋白表达情况。结果上述质粒在真核细胞均有HpVL1、蛋白的高度表达；HLlE7I表达的L1蛋白定位于细胞质而HL1E7Ⅱ表达的L1蛋白定位于细胞核；密码子修饰后的6HL1和HL1E7基因能有效表达HPV6bL1样的假病毒颗粒。结论HPV6 E7蛋白的羧基端有核定位信号存在，密码子修饰能增加基因的表达效率，可用于目的基因的表达。