实验犬心肌细胞NF-κB的快速提取及鉴定

Rapid extraction and identification of NF-κB in canine cardiac myocyte

目的 建立实验犬心肌组织细胞核转录因子 (NF -κB)快速提取及鉴定方法。方法 采用液氮快速冷冻使犬心肌组织破碎 ,并优化核蛋白提取鉴定条件 ,参考哺乳动物鼠Igκ轻链基因 ,设计可与犬心肌细胞核转录因子结合的序列 ,在不同的提取和标记条件下 ,通过凝胶阻滞分析NF -κB活性。结果 两种提取及标记条件 ,凝胶阻滞分析结果有明显不同。按优化实验的方法提取和标记NF -κB ,实验结果更为理想。结论 优化提取条件后 ,提取犬心肌细胞NF -κB的方法简便、快速 ;设计的特异DNA探针可与犬心肌组织细胞NF -κB特异结合并显示良好的结合活性 ,为实验犬在急性事件时其心肌组织细胞NF -κB活性的研究提供了可行方法。