应用随机PCR技术制备靶基因文库随机片段
Preparation of the random fragments of target gene library using random PCR technology
摘要
目的 用随机PCR技术制备构建靶基因文库的随机基因片段。方法 先扩出靶基因 (HIV1Envgp160 )片段 ,然后设计两条引物 ,1条为锚定随机引物用于扩出靶基因的随机片段 ,另 1条为锚定特异引物用于对随机片段进行扩增 ,得到大量的随机片段 ;优化模板量、dNTP浓度、反应时间、温度和DNA聚合酶等反应条件 ,扩出靶基因的随机片段。结果 得到用于建库的理想靶基因随机片段。结论 随机PCR是制备靶基因文库随机片段的一个简便有效方法。
出处
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2004年第20期1878-1880,共3页
Journal of Third Military Medical University
参考文献8
-
1[1]Smith G P. Filamentous fusion phage: novel expression vector that display cloned antigen on the virion surface[J]. Science, 1985, 228(4705): 1315-1317.
-
2[2]Parmley S F, Smith G P. Antibody-selectable filamentous fusion phage vectors:affinity purification of target genes[J]. Gene, 1988, 73(2): 305-318.
-
3[3]Perham R N, Terry T D, Willis A E, et al. Engineering a peptide epitope display system on filamentous bacteriophage[J]. FEMS Microbiol Rev, 1995, 17(1-2): 25-31.
-
4[4]Wierzbicki A, Kiszka I, Kaneko H, et al. Immunization strategies to augment oral vaccination with DNA and viral vectors expressing HIV envelope glycoprotein[J]. Vaccine, 2002, 20 (9-10): 1295-1307.
-
5杜桂鑫,潘文胜,陈万荣,王海涛.应用随机PCR方法鉴定一株肠道病毒[J].中华实验和临床病毒学杂志,2001,15(3):242-244. 被引量:3
-
6[6]Anderson S. Shotgun DNA sequencing using cloned Dnase I-generated fragments[J]. Nucleic Acids Res, 1981, 9(13): 3015-3027.
-
7[7]Froussard P. A random-PCR method (rPCR) to construct whole cDNA library from low amounts of RNA[J]. Nucleic Acids Res, 1992, 20(11): 2900.
-
8[8]Lundberg K S, Shoemaker D D, Adams M W, et al. High-fidelity amplification using a thermostable DNA polymerase isolated from pyrococcus furiosus[J]. Gene, 1991, 108(1): 1-6.
共引文献2
-
1万言珍,岳盈盈,李鹏,李志会,李军,孟红.一起病毒性脑炎病因的分子生物学鉴定[J].中华实验和临床病毒学杂志,2007,21(4):313-315.
-
2郑夔,黄吉城,李小波,洪烨,师永霞,幸芦琴,相大鹏,郭波旋,胡龙飞.南方五省口岸蚊类携带虫媒病毒调查[J].中国国境卫生检疫杂志,2009,32(3):181-186. 被引量:2
-
1王红,赵敏.随机PCR及其应用[J].中华疾病控制杂志,1997,9(1):66-68. 被引量:1
-
2汪华,高瞻,俞晓进,潘浩,庄菱,刘光中.三起甲型副伤寒爆发的分子流行病学研究[J].疾病控制杂志,2000,4(4):317-320. 被引量:2
-
3夏桂枝,叶礼燕,王红,俞守义,白石山.志贺菌痢暴发菌株的分子流行病学分析[J].中国公共卫生,2003,19(11):1296-1298. 被引量:1
-
4李,潘毓宣,张春燕,胡秀兰,田苗.PCR结合索氏转移杂交在结核病诊断中的应用[J].中华结核和呼吸杂志,1994,17(4):238-240. 被引量:13
-
5夏桂枝,叶礼燕,王红,俞守义,白石山.志贺氏菌痢暴发菌株的分子流行病学分析[J].福州总医院学报,2003,10(4):199-201.
-
6石建群,姚登福,孟宪镛,黄介飞,倪润州,张弘,魏群,肖明兵,江枫.肝癌病人HCV感染及其核心基因序列分析[J].江苏医药,1998,24(6):390-392. 被引量:1
-
7张红卫,许汴利,苏云普,颜秋叶,贺丽君.RAPD-PCR技术筛选间日疟原虫基因标记[J].中国预防医学杂志,2006,7(4):251-253. 被引量:3
-
8姚登福,孟宪镛,黄介飞,蒋道荣,倪润洲,清水一郎,伊东进.慢性丙型肝炎患者HCV核心蛋白基因及其肽链的序列分析[J].南通医学院学报,1998,18(2):135-138.
-
9徐乐焱,姜国辉.PCR法检测研究HP传染途径[J].国外医学(放射医学核医学分册),1998,22(4):145-148. 被引量:1
-
10王红,吴爱军,俞守义,钟文龙,赵敏,吴敏.江门市福氏2a菌痢暴发的RAPD分析[J].中华疾病控制杂志,1997,9(2):96-98. 被引量:1